色譜柱的使用和保養
色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件，被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定，色譜柱的性能起著(zhù)決定性的作用。因此，在日常工作中，應特別注意色譜柱的正確使用和維修保養，以延長(cháng)色譜柱的使用壽命。
1、使用預柱和保護柱。預柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了*的平衡，并防止了對柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱。保護柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱，保護柱應與色譜柱的填料相同。預柱和保護柱可以經(jīng)常更換，而不需要經(jīng)常更換色譜柱，這就延長(cháng)了色譜柱的使用壽命。
2、防止氣體進(jìn)入色譜柱。有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì )使柱效降低甚至形成微小的難以驅除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過(guò)脫氣的流動(dòng)相，并且要嚴格按照下列步驟來(lái)安裝色譜柱。a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀(guān)察是否有溶劑滲出；b.如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；c.如無(wú)溶劑滲出時(shí)，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動(dòng)相來(lái)反方向沖洗色譜柱，以便將柱內的空氣排除。較好以0.2ml/min的小流量來(lái)沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì )導致柱性能的降低；d.如果流出的溶劑里不含有氣泡，說(shuō)明柱內的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
3、色譜柱的清洗。為了不使被測物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應及時(shí)地清洗色譜柱。首先要用對被測樣品洗脫能力強的溶劑來(lái)洗脫色譜柱，如果流動(dòng)相是緩沖溶液，則應先用蒸餾水來(lái)沖洗色譜柱，以沖掉柱內的鹽，然后再用合適的溶劑來(lái)沖洗。
凝膠濾過(guò)色譜法(GelFiltrationChromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動(dòng)相，用完之后當然要用蒸餾水來(lái)沖洗。如果是連續操作，可以將緩沖溶液置于柱內過(guò)夜，但較好是維持小流速(<0.5ml/min)以防止緩沖鹽的析出，如果流動(dòng)相中含有鹵化物，即使是停一夜，也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈，以防止它們對柱體的腐蝕。
4、色譜柱的存放。如果色譜柱暫時(shí)不用，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：
a.幾天之內的短期放置，應先用溶劑沖洗好色譜柱(如凝膠柱則用蒸餾水來(lái)沖洗)，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。
b.如果色譜柱長(cháng)期不用，僅用上述方法來(lái)處理就不行了，這時(shí)應使用色譜柱使用說(shuō)明書(shū)中所指明的溶劑來(lái)充滿(mǎn)色譜柱，反相柱一般使用甲醇，正相柱則可用正已烷或庚烷，而凝膠柱則不能用水了，因柱內如果有微生物的生長(cháng)則會(huì )使柱效降低，此時(shí)應用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來(lái)沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴。色譜柱長(cháng)期放置時(shí)，一定要將色譜柱的兩端封嚴，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現象，因這可導致柱效的嚴重降低。
c.色譜柱應貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內就會(huì )結冰，這也將導致柱效的降低。
