液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀在生物化學(xué)、生物醫學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等領(lǐng)域均有廣泛應用。液相色譜儀在使用中有哪些常見(jiàn)故障?如何處理?
1、柱壓高。
原因:緩沖液鹽分沉積于柱內;或者是樣品污染沉積。
措施:如果是緩沖液鹽分沉積于柱內,則用40~50℃的純水低速正向沖洗柱子,逐漸提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后再用常溫純水清洗,zui后用純甲醇沖洗柱子30分鐘。
如果是樣品污染沉積導致,則用純水反向沖洗柱子,再用甲醇沖洗,隨后用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子,再用甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后用甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘。
2、氣泡溢出。
原因:主要是由于過(guò)濾器長(cháng)期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,內部霉菌繁殖形成菌團阻塞了過(guò)濾器導致。
措施:將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中,利用超聲清洗既分鐘?;蛘邔⑦^(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時(shí),再用純水清洗,打開(kāi)purge鍵清洗脫氣,直到?jīng)]有氣泡冒出。打開(kāi)泄壓閥,打開(kāi)泵,純水沖洗過(guò)濾器1小時(shí)左右。
3、無(wú)壓力指示,也無(wú)液體流過(guò)。
原因:泵密封墊圈磨損;或大量氣泡進(jìn)入泵體。
措施:更換密封墊圈,或用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
4、壓力波動(dòng)大,流量不穩定。
原因:系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物。
措施:觀(guān)察流動(dòng)相的量,動(dòng)相要充分脫氣。如果是單向閥和閥座不能密封,則拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
5、出峰不佳,峰分叉。
原因:色譜柱被污染,或者柱頭填料塌陷。
措施:色譜柱被污染則需清洗色譜柱。如果柱頭填料塌陷或硬結,則去除硬結部分,沖新裝入新填料。反復滴甲醇,壓緊不銹鋼桿,直至填滿(mǎn)。柱頭用甲醇沖洗干凈。
6、峰面積重復性不佳。
原因:進(jìn)樣閥漏液;或加樣針不到位,或者是液量不足。
措施:更換進(jìn)樣閥墊圈。如果是加樣針不到位,則將加樣針插到底,液量不足則注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態(tài)轉換到INJECT狀態(tài)。避免注射過(guò)濃的樣品溶液。